固相萃?。⊿olid Phase Extraction，簡(jiǎn)稱SPE）,也稱固相提取，是一項(xiàng)結(jié)合了選擇性保留、選擇性洗脫等過(guò)程的分離技術(shù)。 SPE也是一個(gè)柱色譜分離過(guò)程，分離機(jī)理、固定相和溶劑的選擇等方面與液相色譜（HPLC）有許多相似之處。

SPE是一種吸附劑萃取，樣品通過(guò)填充吸附劑的一次性萃取柱，分析物和雜質(zhì)被保留在柱上，然后分別用選擇性溶劑去除雜質(zhì)，洗脫出分析物，從而達(dá)到分離的目的。

SPE的凈化模式主要取決于填充劑的類型和溶劑的性質(zhì)，有以下2種：

模式一：保留目標(biāo)物，去除雜質(zhì)

固相萃取操作一般有四步（見(jiàn)下圖1）：

1）活化--除去小柱內(nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境（注意整個(gè)過(guò)程不要使小柱干涸）。

2）上樣--將樣品用一定的溶劑溶解，轉(zhuǎn)移入柱并使組分保留在柱上（注意流速不要過(guò)快，以1ml/min 為宜，大不超過(guò)5ml/min）。

3）淋洗--da程度除去干擾物（建議此過(guò)程結(jié)束后把小柱*抽干）。

4）洗脫--用小體積的溶劑將被測(cè)物質(zhì)洗脫下來(lái)并收集（注意流速不要過(guò)快，以1ml/min為宜）。

圖1.保留目標(biāo)物凈化模式

絕大多數(shù)的樣品都是用保留目標(biāo)物的模式凈化的，下面舉個(gè)例子：

食品中乙二胺四乙酸二鈉的檢測(cè)，樣品經(jīng)提取，絡(luò)合后，凈化；

SPE柱：月旭 Welchrom®SAX 150mg/6mL；

活化：5 mL 甲醇、5 mL 水，棄去；

上樣：待凈化液全部上樣，控制流速，不宜過(guò)快，棄去；

淋洗：依次用5mL水，5mL甲醇淋洗，抽干；

洗脫：5mL5%甲酸甲醇水洗脫，抽干，收集洗脫液定容至5mL，過(guò)0.22μm濾膜，供液相色譜儀測(cè)定。

圖2、八寶粥樣加標(biāo)150mg/kg過(guò)柱圖譜

模式二：保留雜質(zhì)

固相萃取操作一般有三步（見(jiàn)圖2）：

1）、活化--除去柱子內(nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境（注意整個(gè)過(guò)程不要使小柱干涸）。

2）、上樣--將樣品轉(zhuǎn)移入柱，此時(shí)大部分目標(biāo)化合物會(huì)隨樣品基液流出，雜質(zhì)被保留在柱上，故此步驟要開(kāi)始收集（注意流速不要過(guò)快）。

3）、洗脫---用小體積的溶劑將組分淋洗下來(lái)并收集，合并收集液（注意流速不要過(guò)快）.

圖3.保留雜質(zhì)凈化模式

這種凈化模式多用于食品或農(nóng)殘的檢測(cè)，下面舉個(gè)例子：

食品中丙烯酰胺的檢測(cè)，樣品經(jīng)提后，凈化；

SPE柱：月旭Welchrom® C18E 500 mg/6mL；

活化：5mL甲醇，5mL水；

上樣：待凈化液，收集；

洗脫：2mL30%甲醇分次潤(rùn)洗燒瓶，再上樣，收集，抽干；

合并上樣液和洗脫液，并用30%甲醇水定容至5mL，并過(guò)0.22 µm濾膜，上HPLC檢測(cè)。

圖4.咖啡樣品加標(biāo)10mg/kg